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Registro Completo |
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Biblioteca(s): |
Embrapa Agrobiologia. |
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Data corrente: |
05/02/2001 |
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Data da última atualização: |
07/10/2011 |
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Autoria: |
RIBEIRO, J. R. de A. |
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Afiliação: |
CNPAB. |
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Título: |
Aplicação da técnica de Elisa no estudo ecológico de Rhizobium sp. isolados de nódulos de caupi (Vigna unguiculata (L.) Walp.) originários da região nordeste brasileira. |
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Ano de publicação: |
1999 |
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Fonte/Imprenta: |
1999. 124f. Tese (Mestrado em Programa de Biotecnologia Vegetal) - Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro, Rio de Janeiro, RJ. |
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Idioma: |
Português |
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Notas: |
Orientado por: Norma Gouvêa Rumjanek. |
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Conteúdo: |
A utilização atual do ambiente vem levando a degradação progressiva da qualidade de vida na planeta. Somente conhecendo as leis que regem os ecossistemas se poderá ter a chance de utiliza-lo de uma forma sustentável e duradoura. Os microorganismos do solo estão incluídos em diversos ciclos biogeoquímicos desempenhando um papel fundamental na biosfera. A utilização de técnicas marcadoras são essenciais nos estudos dos microorganismos, pois e necessário fazer a identificação e a quantificação do microrganismo na ambiente. Este trabalho utiliza a técnica de Elisa indireto para determinar a ocupação nos nódulos de caupi ( Vigna unguiculata (L.) Walp.) por estirpes de rizóbio. Esta cultura e de extrema importância para a região nordeste brasileira, tanto pela produção de um alimento rico em proteínas de boa digestibilidade em uma área de baixa produção de proteína animal quanto pela demanda de mão de obra exigida pela cultura do caupi, gerando 2,4 milhões de empregos diretos. Com a intenção de diminuir o tempo na identificação, a adaptação desta técnica visa determinar a bacteria responsável pela ocupação, diretamente do extrato de nódulo dispensando o cultivo da bacteria em meio de cultura. Foram produzidos 12 antissoros policlonais em coelhos. Para dar confiabilidade neste processo de identificação, os antissoros foram purificados com proteína A de Staphilococus aureus. Alguns antissoros, mesmo após a purificação, apresentaram um nível de reação cruzada insatisfatório. Para garantir a segurança dos resultados, cada antissoro deve ter padronizado as condições de sua utilização e a quantidade de reações cruzadas presentes. A reatividade imunológica fornece informações sobre a associação entre as bactérias e pode ser utilizado para estabelecer um agrupamento sorológico. Para atender aos critérios considerados importantes para a associação com dados quantitativos de reatividade imunológica obtidos por ELISA, foi sugerida uma transformação dos dados de reatividade e uma modificação no índice de distância de Bray-Curts. O agrupamento dos isolados de rizóbio de nódulos de caupi originários da região nordeste brasileira revelou a formação de 10 grupos a uma distância de 0,5 numa escala de 0 a 1. Seis grupos formados demonstram uma similaridade com as estirpes tipos estudadas e são formados por isolados obtidos em áreas sobre o sistema de cultivo de sequeiro. Os outro 4 grupos formados concentram os isolados mais eficientes com relação a fixação biológica de nitrogênio em caupi e não agrupam com nenhuma das estirpes tipos estudadas sugerindo um grupo isolado com bactérias eficientes para caupi que poderão ser utilizadas como inoculantes para esta cultura. The use natural resources is promoting a gradual degradationof life quality in the planet. In this sense, it is urgent to improve understanding of the laws that rule ecosystem functions as a way to guarantee their long lasting and sustainable use. Soil microorganisms are components of several biogeochemical cycles where they are important on nutrient cycling, decomposition of organic matter and availability of some nutrients to plant growth. Nevertheless, the identification and quantification of these groups of organisms in the environment depend strongly on the development of marker techniques. In this work, indirect ELISA was used to determine cowpea (Vigna unguiculata (L.) Walp) nodule occupation by rhizobial strains. Cowpea produces a grain with a high protein concentration and for this reason is a crop extremely important to the Brazilian northeast region where human diet is not rich in animal protein, furthemore the crop generates 2.4 millions temporary jobs. The use of indirect ELISA speeds up the identification of the nodule colonizing strain by utilizing nodule extract avoiding bacteria isolation from culture media. Twelve anti-serums were produced in rabbits A purification of the anti-serum with protein A from Staphilococcus aureus increases the speceficity of the reaction reducing the level of cross reactions increasing the confiability level of the results. On the other hand, cross reactions characterized by means of the unpurified antiserum are useful to establish serological relationships among the cowpea nodule isolates. The results of indirect ELISA with 12 unpurified antisera against 40 isolates originated from the Brazilian northeast region were used for determining a similarity matrix worked out by a modofied Bray-Curts distance index. The modification was performed in order to fulfill criteria considered relevant for these type of quantitative data. Clustering analysis revesled the formation of 10 groups at a distance of 0,5 in a full scale from 0 to 1. Six groups formed are closer to the type strains used and they are composed mostly by isolates originated from non-irrigated areas cultivated with cowpea. Four groups were composed by isolates displaying efficient biological nitrogen fixation activity, which did not have similarity with the type strains of Bradyrhizobium included in the analysis. The results suggest that these groups may represent a new species capable of efficiently nodulating cowpea, which may be used as an efficient inoculant for the crop. MenosA utilização atual do ambiente vem levando a degradação progressiva da qualidade de vida na planeta. Somente conhecendo as leis que regem os ecossistemas se poderá ter a chance de utiliza-lo de uma forma sustentável e duradoura. Os microorganismos do solo estão incluídos em diversos ciclos biogeoquímicos desempenhando um papel fundamental na biosfera. A utilização de técnicas marcadoras são essenciais nos estudos dos microorganismos, pois e necessário fazer a identificação e a quantificação do microrganismo na ambiente. Este trabalho utiliza a técnica de Elisa indireto para determinar a ocupação nos nódulos de caupi ( Vigna unguiculata (L.) Walp.) por estirpes de rizóbio. Esta cultura e de extrema importância para a região nordeste brasileira, tanto pela produção de um alimento rico em proteínas de boa digestibilidade em uma área de baixa produção de proteína animal quanto pela demanda de mão de obra exigida pela cultura do caupi, gerando 2,4 milhões de empregos diretos. Com a intenção de diminuir o tempo na identificação, a adaptação desta técnica visa determinar a bacteria responsável pela ocupação, diretamente do extrato de nódulo dispensando o cultivo da bacteria em meio de cultura. Foram produzidos 12 antissoros policlonais em coelhos. Para dar confiabilidade neste processo de identificação, os antissoros foram purificados com proteína A de Staphilococus aureus. Alguns antissoros, mesmo após a purificação, apresentaram um nível de reação cruzada insatisfatório. Para gar... Mostrar Tudo |
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Palavras-Chave: |
Caupi. |
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Thesagro: |
Bactéria; Coelho; Elisa; Feijão de Corda; Inoculação; Soro; Vigna Unguiculata. |
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Thesaurus Nal: |
cowpeas; inoculation methods; rabbits. |
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Categoria do assunto: |
-- |
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Com a intenção de diminuir o tempo na identificação, a adaptação desta técnica visa determinar a bacteria responsável pela ocupação, diretamente do extrato de nódulo dispensando o cultivo da bacteria em meio de cultura. Foram produzidos 12 antissoros policlonais em coelhos. Para dar confiabilidade neste processo de identificação, os antissoros foram purificados com proteína A de Staphilococus aureus. Alguns antissoros, mesmo após a purificação, apresentaram um nível de reação cruzada insatisfatório. Para garantir a segurança dos resultados, cada antissoro deve ter padronizado as condições de sua utilização e a quantidade de reações cruzadas presentes. A reatividade imunológica fornece informações sobre a associação entre as bactérias e pode ser utilizado para estabelecer um agrupamento sorológico. Para atender aos critérios considerados importantes para a associação com dados quantitativos de reatividade imunológica obtidos por ELISA, foi sugerida uma transformação dos dados de reatividade e uma modificação no índice de distância de Bray-Curts. O agrupamento dos isolados de rizóbio de nódulos de caupi originários da região nordeste brasileira revelou a formação de 10 grupos a uma distância de 0,5 numa escala de 0 a 1. Seis grupos formados demonstram uma similaridade com as estirpes tipos estudadas e são formados por isolados obtidos em áreas sobre o sistema de cultivo de sequeiro. Os outro 4 grupos formados concentram os isolados mais eficientes com relação a fixação biológica de nitrogênio em caupi e não agrupam com nenhuma das estirpes tipos estudadas sugerindo um grupo isolado com bactérias eficientes para caupi que poderão ser utilizadas como inoculantes para esta cultura. The use natural resources is promoting a gradual degradationof life quality in the planet. In this sense, it is urgent to improve understanding of the laws that rule ecosystem functions as a way to guarantee their long lasting and sustainable use. Soil microorganisms are components of several biogeochemical cycles where they are important on nutrient cycling, decomposition of organic matter and availability of some nutrients to plant growth. Nevertheless, the identification and quantification of these groups of organisms in the environment depend strongly on the development of marker techniques. In this work, indirect ELISA was used to determine cowpea (Vigna unguiculata (L.) Walp) nodule occupation by rhizobial strains. Cowpea produces a grain with a high protein concentration and for this reason is a crop extremely important to the Brazilian northeast region where human diet is not rich in animal protein, furthemore the crop generates 2.4 millions temporary jobs. The use of indirect ELISA speeds up the identification of the nodule colonizing strain by utilizing nodule extract avoiding bacteria isolation from culture media. Twelve anti-serums were produced in rabbits A purification of the anti-serum with protein A from Staphilococcus aureus increases the speceficity of the reaction reducing the level of cross reactions increasing the confiability level of the results. On the other hand, cross reactions characterized by means of the unpurified antiserum are useful to establish serological relationships among the cowpea nodule isolates. The results of indirect ELISA with 12 unpurified antisera against 40 isolates originated from the Brazilian northeast region were used for determining a similarity matrix worked out by a modofied Bray-Curts distance index. The modification was performed in order to fulfill criteria considered relevant for these type of quantitative data. Clustering analysis revesled the formation of 10 groups at a distance of 0,5 in a full scale from 0 to 1. Six groups formed are closer to the type strains used and they are composed mostly by isolates originated from non-irrigated areas cultivated with cowpea. Four groups were composed by isolates displaying efficient biological nitrogen fixation activity, which did not have similarity with the type strains of Bradyrhizobium included in the analysis. The results suggest that these groups may represent a new species capable of efficiently nodulating cowpea, which may be used as an efficient inoculant for the crop.
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Registro original: |
Embrapa Agrobiologia (CNPAB) |
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| 1. |  | BORTOLI, G.; PRIORI, D.; CARVALHO, A. Z.; COSTA, C. T.; IORCZESKI, E.; BONOW, S.; CONSOLI, L. Caracterização molecular de acessos de Trigo Frontana do BAG da Embrapa. In: MOSTRA DE PÓS-GRADUAÇÃO DA EMBRAPA TRIGO, 1., 2008, Passo Fundo. Resumos... Passo Fundo: Embrapa Trigo, 2008. 1 p. html. (Embrapa Trigo. Documentos online, 95).| Tipo: Resumo em Anais de Congresso |
| Biblioteca(s): Embrapa Trigo. |
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| 2. | | ZANELLA, A.; PRIORI, D.; BORTOLI, G.; BONOW, S.; IORCZESKI, E. J. Monitoramento da viabilidade de acessos conservados no banco ativo de germoplasma de trigo. In: MOSTRA DE INICIAÇÃO CIENTÍFICA DA EMBRAPA TRIGO, 4., 2008, Passo Fundo. Resumos... Passo Fundo: Embrapa Trigo, 2008. 1 p. html. (Embrapa Trigo. Documentos online, 94).| Tipo: Resumo em Anais de Congresso |
| Biblioteca(s): Embrapa Trigo. |
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